锦州医科大学成人本科学士学位考试题
一、选择题（单选，每题2分，共25题，总计50分）
1、构建真核细胞表达载体时不需要的顺式元件是(C)
A.启动子B.筛选标记C.SD序列D.加尾信号E.增强子
2、人体的DNA带什么电荷？(C)
A.正电荷B.不带电荷C.负电荷D.不确定E.因不同个体而不同
3、最早构建的质粒载体是(B)
A.pUCB.p BR322 C.pUR278 D.pGPD-2E.柯斯质粒
4、转基因动物制备时，能使目的基因表达不影响邻近基因表达的元件是(C)
A.启动子B.增强子C.绝缘子D.沉默子E.Kozak序列
5、PCR引物设计时，按经验，引物自身存在的连续互补序列一般不超过(A)
A.3bp B.5bp C.7bp D.9bpE.10bp
6、双脱氧合成终止法测DNA序列时，加A体系中所得到的DNA片段都是以哪个核苷酸结尾(A)
A.A B.C C.G D.TE.U
7、原核细胞mRNA与核糖体特异结合的序列称为(C)
A.Kozak序列B.启动子C.SD序列D.起始密码E.帽子结构
8、与分泌表达相关的元件是(C)
A.启动子B.核糖体识别位点C.信号肽序列D.报告基因E.加尾信号
9、能检测不同细胞表达区别的PCR技术是(B)
A.彩PCRB.差异显示PCRC.原位PCRD.不对称PCRE.定量PCR
10、人类基因组计划是哪年完成的(E)
A.1985B.1990C.1995D.1997E.2003
11、PCR引物设计时，与非扩增区的同源性不能超过(C)
A.50%B.60%C.70%D.80%E.90%
12、能检测目的基因片段缺失的PCR方式为(B)
A.筑巢PCRB.多重PCRC.原位PCRD.不对称PCRE.反向PCR
13、在一个遗传位点上具有一个以上的等位基因，在体中的出现频率高于多少时可称为一个多态性位点(A)
A.1%B.5%C.10%D.15%E.20%
14、基因工程中容量最大的载体是(E)
A.质粒B.噬菌体C.病毒D.粘粒E.酵母人工染体
15、PCR引物设计时，其长度应在多少个碱基对范围内(D)
A.5~15B.10~20C.15~20D.15~30E.20~30
16、分泌表达时，在目的蛋白的N端融合一段(B)
A.细胞内源蛋白B.信号肽C.序列标签D.分子伴侣E.内含子
17、可以产生大量单链DNA的PCR技术称作(B)
A.共享引物PCRB.不对称PCRC.彩PCRD.定量PCRE.差异显示PCR
18、基因工程中使用最广泛的基因载体是(A)
A.质粒B.噬菌体C.病毒D.穿梭质粒E.粘粒
19、PCR引物设计时，G+C的含量应在(E)
A.10~20%B.15~25%C.30~50%D.40~50%E.40~60%
20、DNA的二级结构是:(E)
A.α-螺旋B.β-折叠C.超螺旋结构D.β-转角E.双螺旋结构
21、DNA完全水解后的产物是：(C)
A.脱氧核糖B.脱氧核糖和碱基C.脱氧核糖、碱基和磷酸D.脱氧核糖和磷酸E.碱基和磷酸
22、大部分真核细胞mRNA的3’—末端都具有：(A)
A.多聚AB.多聚UC.多聚TD.多聚CE.多聚G
23、DNA的解链温度指的是：(B)
A.A260达到最大值时的温度B.A260达到最大值的50%时的温度
C.DNA开始解链时所需要的温度D.DNA完全解链时所需要的温度E.A280达到最
大值的50%时的温度
24、mRNA分子中与20种氨基酸相对应的密码有：(C)
A.64种B.63种C.61种D.60种E.20种
25、下列几种DNA分子的碱基组成比例不同，哪一种DNA的Tm最低？(D)
A.DNA中A-T占15%B.DNA中G-C占25%C.DNA中G-C占40%D.DNA中A-T占80%
E.DNA中G-C占55%
二、名词解释（每题3分，共5题，总计15分）
1、引物2、TaqDNA聚合酶3、退火4启动子5、DNA变性
1、引物：是一种与DNA模板链互补的线性核苷酸变短，其3’末端为游离的-OH，细胞内复制所需的引物是一小段RNA。催化游离dNTP之间相互聚合。
2、TaqDNA聚合酶：从一种嗜热菌株中分离得到的耐热的DNA聚合酶。
成人本科考试时间
3、退火:热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程成为退火。
4、启动子：是位于转录起始点附近，且为转录所必需的序列元件。
5、DNA变性：当DNA收到某些理化因素作用时，DNA双链互补碱基对之间的氢键和相邻碱基之间的堆积力受到破坏，DNA分子被解开成单链，逐步形成为无规则线团的构象，不涉及核苷酸间共价键的断裂。
三、简答题（共2题，总计15分）
1、总RNA提取后，如何鉴定RNA的纯度，至少写出两种方法。
(1)紫外分光光度法：先通过A260与A280的比值判断核算的纯度，纯RNA的A260与A280的比值等于2.0，比值升高或降低均表示样品不纯。
(2)琼脂糖凝胶电泳法：基因组DNA的分子量远远大于RNA，两者之间电泳迁移率存在很大差别，用荧光染料EB为示踪剂的AGE即可观察到RNA分子中是否含有DNA，细胞RNA的
琼脂糖凝胶电泳一般可见三条条带，条带模糊比例不合适及弥散明显说明RNA有严重降解。
2、PCR的基本原理和基本步骤，你知道有几种PCR?（至少写出两种）
（一）、基本原理
以待扩增的DNA分子为模板，以一对人工合成的、分别与模板的5’端和3’端互补的单链寡核苷酸作为引物，在耐热DNA聚合酶催化下，按照半保留复制的原则合成两个子代DNA；接着以子代DNA为模板再次合成，如此反复循环十数次，最终将原始模板放大数百万倍。
（二）、PCR的基本步骤
1.反应体系：包括模板DNA，耐热DNA聚合酶，两种引物，4种dNTP和含有镁离子的缓冲液。
2.反应过程
(1)变性:将反应体系加热加热到94~95度，持续30秒左右，使待扩增DNA完全解链成单链。
(2)退火：使温度迅速下降到适宜温度并维持30秒，使引物与模板DNA两条链的3’端互补配对。退火温度由引物Tm决定，一般比引物的Tm低5度，其范围常在55~68度。(3)延伸：将反应体系温度升高到72度，此时DNA聚合酶将以单链DNA为模板，将单核甘酸逐个添加到引物的3’端，使新链不断延长，直至合成结束。