一：选择题
1、酶的主要来源是（C）
2、所谓“第三代生物技术”是指 (A)
A、海洋生物技术 B、细胞融合技术 C、单克隆技术 D、干细胞技术
3、菌体生长所需能量与菌体有氧代谢所能提供的能量在什么情况下，菌体往往会产生代谢副产物乙酸：(A)
A、大于 B、等于 C、小于 D、无关
A、人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用
B、人促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定
C、大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活
D、人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感
E、大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化
5、目前基因最常用的载体是：(B)
A、腺病毒 B、反转录病毒 C、腺相关病毒 D、痘苗病毒 E、疱疹病毒
6、cDNA第一链合成所需的引物是：（D）
A、Poly A B、Poly C C、Poly G D、Poly T E、发夹结构
7、为了减轻工程菌的代谢负荷，提高外源基因的表达水平，可以采取的措施有：(A)
A将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段
B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达
C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的表达
D、当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制
8、基因工程制药在选择基因表达系统时，首先应考虑的是：(A)
A、表达产物的功能 B、表达产物的产量 C.表达产物的稳定性
D.表达产物分离纯化的难易
9、疫苗出产前需进行理化鉴定、效力鉴定和（安全性鉴定）。
10、基因工程药物的化学本质属于：(C)
A.糖类 B.脂类 C.蛋白质和多肽类 D.氨基酸类
11、用聚二乙醇（PEG）诱导细胞融合时，下列错误的是：(C)
A、PEG的相对分子量大，促进融合率高 B、PEG的浓度高，促进融合率高
C、PEG的相对分子量小，促进融合率高 D、PEG的最佳相对分子量为4000
12、以大肠杆菌为目的基因的表达体系，下列正确的是：(C)
A、表达产物为糖基化蛋白质 B、表达产物存在的部位是在菌体内
C、容易培养，产物提纯简单 D、表达产物为天然产物
13、人类第一个基因工程药物是：(A)
A、人胰岛素 B、重组链激酶 C、促红细胞生成素 D、乙型肝炎疫苗
A、人-鼠嵌合抗体 B、单链抗体 C、鼠源性单克隆抗体 D、单域抗体
15、动物细胞培养的条件中，不正确的是：(D)
A.最适pH为7.2-7.4 B.最适温度为37±0.5C
C.最理想的渗透压为290-300mOsm/kg D.氧浓度为100%
16、第三代抗体是指：(D)
A、B淋巴细胞合成和分泌的球蛋白 B、多发性骨髓瘤细胞产生的免疫球蛋白
C、融合细胞产生的单克隆抗体 D、利用基因工程技术制备的基因工程抗体
17、现代生物技术的标志是：(C)
A、DNA互补双螺旋结构模型的提出 B、DNA测序技术的诞生
C、第一只克隆羊“多莉”的诞生 D、人类基因组草图的完成
18、获得目的基因最常用的方法是：(B)
A、化学合成法 B、PCR技术 C、逆转录法 D、DNA探针技术
19、疫苗组成是由抗原和（佐剂）组成
20、鸟法克隆目的基因的战略适用于（A）
A、原核细菌 B、酵母菌 C、丝状真菌 D、植物 E、人类
21、cDNA法获得目的基因的优点是：（B）
A.成功率高 B.不含内含子 C.操作简便
D.表达产物可以分泌 E.能纠正密码子的偏爱性
22、有机相酶反应的优点：
1．有利于疏水性底物的反应；2．可提高酶的热稳定性；3．从低沸点的溶剂中易分离纯化产物；4．热力学平衡向产物方向移动如脂合成和肽合成；5．减少由水引起的副反应，如水解反应；6．酶易于实现固定化；7．酶和产物易于回收；8．可避免微生物污染。
23、抗体发展阶段：抗血清、单克隆抗体、基因工程抗体。
24、
25、凝胶过滤层析进行分离的依据是：分子大小
26、质粒载体必备三要素：复制子、选择标记、多克隆位点。
27、体外培养动物细胞三类型：贴壁依赖性细胞、非贴壁依赖性细胞、兼性贴壁细胞。
28、下列关于细胞冻存及复苏过程的描述不正确的是（B）。
A.冻存的细胞提前一天更换全部培养液
B.细胞冻存的原则为快速冻存
C.每只冻存管中以冻存（1～1.5）×106个细胞为宜
D.冻存液中含有8％二甲基亚砜
E.复苏时将冻存细胞从液氮中取出迅速投入42℃温水中速溶
29、能将IgG水解成两个抗原片段和一个可结晶片段的是：（木瓜蛋白酶）。
30、单克隆技术抗体是B细胞和（杂交瘤细胞）的结合。
31、所谓“第二代基因工程”是指(A)
A、蛋白质工程 B、细胞工程 C、酶工程 D、抗体工程
32、酶和细胞固定化最常用、最有效的方法是：(A)
A、载体结合法 B、交联法 C、包埋法 D、选择性热变性法
33、真核基因在大肠杆菌中以融合蛋白形式表达，下列错误的是：(D)
A、基因操作简便 B、只能作抗原用
C、容易实现高效表达 D、易被细菌酶类水解
34、目前应用最广泛的产酶菌是：(A)
A.大肠杆菌 B.枯草杆菌 C.青霉菌 D.链霉菌
35、大肠杆菌的基因表达系统为 (A)
A、pBV220/pET B、YEp/YRp C、pUC/λgt11 D、pBR322/λgt10
36、用于生产α-干扰素的动物细胞是(A)
A、Namalum Namalwa B、Vero C、WI-38 D、MIRC-5
37、外源基因在动物细胞与大肠杆菌中表达产物的主要区别是(A)
A.糖基化 B.产量高 C.性质稳定 D.疗效可靠
38、基因表达最常用的宿主菌是(A)
A.大肠杆菌 B.枯草芽孢杆菌 C.链霉菌 D.酵母
39、筛选杂交瘤细胞（脾-瘤融合细胞）选用的培养基是(B)
A、HT B、HAT C、RMP1640 D、BME
40、采用凝胶过滤法分离单克隆抗体，最高峰属于(A)
A、IgG B、IgM C、IgA D、IgE
41、改造鼠源性单克隆抗体的首要目的是(C)
A、降低相对分子量 B、增加组织通透性 C、降低免疫源性 D、延长半衰期
42、鼠源性单克隆抗体改造后得到小分子抗体，常用的是(B)
A、单域抗体 B、单链抗体 C、Fab片段抗体 D、最小识别单位
43、最具有抗原活性的蛋白是：（丙种球蛋白）。
44、基因工程的单元操作顺序是（A）
A．酶切，连接，转化，筛选，验证 B.酶切，转化，连接，筛选，验证
C．连接，转化，筛选，验证，酶切 D.验证，酶切，连接，筛选，转化
E. 酶切，连接，筛选，转化，验证
45、CHO-K1细胞来源于：答案：中国仓鼠卵巢。
46、下列五个DNA片段含有回文结构的是（D）
A．GAAACTGCTTTGAC B.GAAACTGGAAACTG C.GAAACTGGTCAAAG
D.GAAACTGCAGTTTC E.GAAACTGCAGAAAG
47、
48、T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起，其底物的关键基团是（D）
A．2’-OH和5’-P B. 2’-OH和3’-P C. 3’-OH和2’-P
D. 3’-OH和5’-P E. 5’-OH和3’-P
49、目前工业上生产酶的方法大多数是（微生物发酵）。
50、若某质粒带有lacZ标记基因，那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入（D）
A、半乳糖 B、葡萄糖 C、蔗糖
D、5-溴-4-氯-3-吲哚基-b-D-半乳糖苷（X-gal） E、异丙基巯基-b-半乳糖苷（IPTG）
51、对酶活性有影响的物理化学方法是（温度，pH值，酶的浓度，底物浓度，激活剂，抑制剂）
52、分子杂交的化学原理是形成（E）
A.共价键 B.离子键 C.疏水键 D.配位键 E.氢键
二、填空题
1、人工化学合成DNA新形成的核苷酸的合成方向是(3’→5'),合成的DNA5’末端是（-P），3’末端是（-OH）。
2、理想载体应具备的条件：（至少有一个复制起点，有多克隆位点，具备转化的功能，遗传标记基因，具有较高的载装能力）。
3、进行PCR扩增DNA时，反映体系应加入（DNA模板，DNA聚合酶，引物，dNTP的缓冲液）。
4、细胞培养基三大类：（天然培养基，合成培养基，无血清培养基）。
5、质粒DNA三种构型：（共价闭合环状DNA（cccDNA),开环DNA(ocDNA),线状DNA(1DNA)）。
6、微生物转化中常用的微生物有：（细菌，真菌，放线菌）。
7、生物技术的核心与关键是（基因工程），生物技术的基础是(生化工程)，生物技术的条件是(细胞工程)，生物技术获得最终产物的手段是(发酵工程)。
8、PCR全称是（聚合酶链反应），以（mRNA)为引物，基本反应步骤是（变性，退火，延伸）。
9、在翻译过程中mRNA与核糖体的结合位点：（SD序列，SD序列与起始密码子AUG之间的距离）。
10、克隆真核基因常用的方法：（逆转录法，化学合成法）。
11、将抗体转变为酶的四种途径：（诱导，拷贝，引入，化学修饰）。
12、酶固定法中包埋法有（网格型和微囊型）两种。
13、噬菌体表达载体有（穿梭，插入，置换）三种。
14、鼠源性单克隆抗体改造后的小分子抗体类型（人-鼠联合抗体，改形抗体，Fab抗体，单链抗体，单域抗体，分子识别单位）。
15、抗体药物的特点：（多样性，定向性，特异性）。
偏爱考试版16、质粒载体结构包括：（复制子，选择标记，多克隆位点）。
17、蛋白质药物按分子大小提取方法：（透析，层析，离心，超滤）。
18、核酸类药物分为：（反义核酸，核酶，脱氢核酶，抗基因寡核苷酸，裸DNA疫苗，基因药物）。
19、动物细胞的培养条件：（培养温度，pH值，通氧量，防止污染，基本营养物质，渗透压）。
20、根据动物细胞对生长基质的依赖性可分为：（贴壁依赖性细胞，非贴壁依赖性细胞，兼性贴壁细胞）。
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